EL VENENO DE LA ABEJA POSEE EFECTOS ANTICANCERÍGENOS Y ANTIVÍRICOS MEDIANTE LA INHIBICIÓN DIFERENCIAL DE LA EXPRESIÓN DE HPV E6 Y E7 EN LA LÍNEA CELULAR DE CÁNCER CERVICAL

Yong-Wan Kim, Pankaj Kumar Chaturvedi,  Sung  Nam Chun,  Yang Gu Lee, Woong Shick Ahn

El carcinoma cervical es causado principalmente por la infección con un grupo de alto riesgo de papilomavirus humanos (VPH). Después de la infección por VPH de alto riesgo, se expresan consistentemente las oncoproteínas E6 y E7, que son esenciales para la inmortalización y la transformación de células epiteliales escamosas humanas. En el VPH tipo 16, las mutaciones en el marco de lectura abierto de E6 o E7, o en sus secuencias aguas arriba, alteran la oncogenicidad del virus, lo que sugiere un papel importante de estas proteínas virales en la oncogénesis. En la mayoría de los cánceres cervicales, la función de p53 es desregulada por la proteína E6 de HPV16; E6 se une a p53 y conduce a la degradación de los complejos E6-p53 debido a la digestión de proteasa dependiente de ubiquitina activada con E6. En el presente estudio, se evaluó el efecto del BV en las células de cáncer de cuello uterino para obtener una visión de la base molecular de tumores específicos de inhibición del crecimiento in vitro e in vivo. El BV indujo un aumento en los niveles de p53 y disminuyó la supervivencia de las células cancerosas. El BV desregula los niveles anti-apoptotic de genes como Bcl-2 y Bcl-XS / L; Sin embargo, los niveles de Bax, un gen pro-apoptótico, se regularon.  Además, la eficacia de la terapia con BV ha sido confirmada clínicamente. También se observó una supresión del crecimiento significativo de las células de cáncer cervical cuando el BV se trató en las células. En particular, los tipos de células infectadas con HPV16 eran más susceptibles a la inhibición del crecimiento celular mediado por BV que los tipos de células infectadas con HPV18. En un estudio, las células infectadas con HPV16 (SiHa, 1-2 copias de HPV / célula) eran más susceptibles a la inhibición del crecimiento ejercida por el virus adeno asociado, en comparación con las células infectadas con HPV18 (HeLa, 50 copias de HPV / células). De acuerdo con esto, nuestro estudio mostró que las células CaSki (600 copias de HPV / célula) resultó en más susceptibilidad a la inhibición del crecimiento por tratamientos con BV en comparación con las células HeLa. Además, se observó una supresión similar del crecimiento de células cancerosas entre células C33A y HeLa después de tratamientos con BV, apoyando la teoría de que los efectos del BV estaban mediados de forma significativa por la regulación negativa de la proteína E6 / E7 del VPH 16. La pérdida de propiedades inhibidoras del BV comenzó con la expresión aumentada de E6. Una posible explicación de esto puede ser que la liberación continua de oncogenes E6 supera los efectos inhibitorios del BV, lo que sugiere que los tratamientos con BV podrían ser transitorios ya que el sistema inmune del anfitrión juega un papel importante en la prevención de los efectos sostenidos del BV.

El BV mostró una inhibición de la actividad antiviral y de las citocinas pro-inflamatorias. Se informó que un péptido derivado del BV podría proporcionar inhibidores de p53 para tratar el cáncer. Se requieren estudios adicionales para definir un posible mecanismo de la actividad antiinflamatoria adenoviral p53-like del BV.  El tratamiento con BV indujo la expresión de p53 supresor tumoral así como la expresión del inhibidor de quinasa dependiente de ciclina p21WAF1 / CIP1 de una manera dependiente de la dosis. La melitina es conocida como uno de los principales componentes activos del BV y es un poderoso estimulador de la fosfolipasa A2. El tratamiento con  melitina también indujo potentemente la proteína pro-apoptótica p53, Bax y la expresión de caspasa-3, pero disminuyó la expresión anti-apoptótica de la proteína Bcl-2 . También observó que sobreexpresiónp53 inducida por la apoptosis decélulasCaSki y HeLa, como se determina por Annexin V tinción . Esto es coherente con nuestra observación de que ambas células CaSki y HeLa mostraron muerte celular tras el tratamiento con BV con la regulación negativa de la proteína E6 / E7 de HPV16 / 18, y el tratamiento BV se comporta de manera diferente en células HeLa y CaSki. Se podría sugerir que, en estas células, p53 endógena no se agota con la regulación negativa de la proteína E6 viral que se une a p53, dando lugar a la degradación de los complejos p53-E6 a través de la vía de la ubiquitina. Se informó que el tratamiento con el virus adeno-asociado indujo diferentes niveles de inhibición del crecimiento celular entre tipos de células de cáncer de cuello uterino, lo que sugiere una naturaleza diferente de la infección por VPH de cada célula de cáncer cervical.

El BV desempeña un papel importante en el mantenimiento de la regulación de las citoquinas pro-inflamatorias y se sugirió que participar en distintas vías de señalización.

Por ejemplo, El BV inhibió la expresión de genes inflamatorios específicos que fueron regulados por el factor nuclear-κ B en presencia de LPS, incluyendo la proteína quinasa 8 activada por mitógenos (MAP3K8), TNF, proteína 3 inducida por TNF-α (TNFAIP3), supresor de la señalización de citoquinas 3 (SOCS3), factor 1 asociado al receptor de TNF (TRAF1), proteína de unión a JUN y CREB (CBP). Sin embargo, debe observarse que el BV podría inhibir tanto la expresión de citoquinas pro- y anti-inflamatorias.Puede ser digno de mención identificar ciertos compuestos biológicos en el BV que son responsables de alterar la expresión de la transcripción de ambas citoquinas inflamatorias y el mecanismo por el cual el BV induce la detención del crecimiento en diferentes fases en las células cervicales.

En conjunto, observamos que los tratamientos con BV ejercen un efecto diferencial en la supresión del crecimiento de células de cáncer de cuello uterino a través de la regulación negativa de la proteína E6 / E7 de HPV16 / 18. En particular, las células infectadas con HPV16 (células CaSki) eran más susceptibles a la inhibición del crecimiento ejercida por el BV, en comparación con las células infectadas con HPV18 (células HeLa), lo que sugiere que la fase de inhibición del crecimiento depende de la línea celular de cáncer cervical. Por lo tanto, estos datos apoyan la hipótesis de que el BV desempeña un papel importante en la supresión del crecimiento de células cancerosas por la regulación negativa de la proteína E6 / E7 de HPV16 / 18, dependiendo de la línea celular de cáncer.