EFECTOS INDUCIDOS POR EL VENENO DE APIS MELLIFERA Y SUS COMPONENTES EN MODELOS EXPERIMENTALES DE DOLOR NOCICEPTIVO E INFLAMATORIO

Leonardo A. Merlo aLeandro FS Bastos aAdriana M. Godin aLeonardo TS Rocha aElias B. Nascimento Jr. aAndré LL Paiva aTasso Moraes-Santos bAntônio AC Zumpano cEsther MAF Bastos cLuiz Guilherme D . Heneine cMárcio M. Coelho 

El presente estudio demostró que el BV, <10 melitina presentan actividad antinociceptiva en modelos experimentales de dolor nociceptivo e inflamatorio. Los resultados también indican que múltiples componentes del BV, que actúan por diferentes mecanismos, contribuyen a su actividad antinociceptiva.

Inicialmente, se observó que el BV inhibe ambas fases de la respuesta nociceptiva inducida por el formaldehído . La primera fase de esta respuesta está asociada a la activación directa por el formaldehído de los receptores transitorios de anquirina (TRPA) – 1 receptores que están presentes en los nociceptores (McNamara et al., 2007). La segunda fase de esta respuesta nociceptiva, marcadamente inhibida por fármacos antiinflamatorios (Tjolsen et al., 1992), se asocia con la estimulación de TRPA1(McNamara et al., 2007) y también con el desarrollo de una respuesta inflamatoria desencadenada por muchos mediadores como interleucina (IL) -1β,IL-6, IL-8 y factor de necrosis tumoral (TNF) -α ( Chichorro et al., 2004 ), eicosanoides y NO ( Hunskaar y Hole, 1987; Moore et al., 1991 ). Como el BV inhibe ambas fases de la respuesta nociceptiva inducida por el formaldehído, muestra un perfil mixto parecido al de los fármacos que inhiben el procesamiento central de la respuesta nociceptiva o directamente reduce la excitabilidad de los nociceptores y también de los fármacos que inducen sus efectos a través de la inhibición de producción o acción de diferentes mediadores inflamatorios.

La demostración de la actividad antinociceptiva del BV está en línea con las demostraciones de que el BV inhibe la respuesta nociceptiva inducida por formaldehído en ratones ( Roh et al., 2006 ) y ratas ( Kim et al., 2005 ).

El BV también presentó una actividad antinociceptiva en el modelo de placa caliente, ya que aumentó la latencia para mostrar la respuesta nociceptiva. La respuesta nociceptiva en este modelo es inhibida por fármacos que inhiben el procesamiento nociceptivo central, como los opioides ( Loh et al., 1976 ), los antidepresivos tricíclicos ( Rosland et al., 1988 ) y los fármacos antiasimiento ( Mesdjian et al. 1983 ). La actividad antinociceptiva del BV en este modelo proporciona un apoyo adicional a la inhibición de la primera fase de la respuesta nociceptiva inducida por formaldehído y también a la sugerencia de que dicha actividad, al menos en parte, puede no implicar la inhibición de la producción o acción de mediadores inflamatorios. .

<10 y melitina inhibieron la segunda fase, pero no la primera fase, de la respuesta nociceptiva inducida por el formaldehído. Estos resultados están en línea con la observación de que tanto <10 como la melitina no lograron aumentar la latencia para la respuesta nociceptiva en el modelo de placa caliente. Dichos resultados indican que <10 y la melitina presentan una actividad que se parece más a la de los fármacos antiinflamatorios y menos a los fármacos de acción central. Se ha demostrado que la melitina inhibe la activación de PLA 2 y la producción de mediadores inflamatorios tales como NO y otras especies reactivas de oxígeno, la prostaglandina E e inflamatorias citoquinas (Moon et al., 2007; Park et al., 2004; Saini y otros, 1997; Somerfield et al., 1986 ). En conjunto, los efectos inducidos por el BV,  <10 y melitina en los dos modelos nociceptivos utilizados en el presente estudio indican que el BV contiene componentes que inducen un efecto antinociceptivo como resultado de la activación de diferentes mecanismos. Es poco probable que la falta de coordinación motora o relajación muscular contribuya a la actividad antinociceptiva del BV o sus componentes, ya que no cambiaron el tiempo que los ratones gastaron en la varilla giratoria.

Como estos resultados y otros ya publicados proporcionan evidencia de que parte de la actividad antinociceptiva del BV puede estar asociada con la inhibición de la producción o acción de mediadores inflamatorios,se investigó si el BV, <10 y melitina, además de inhibir la   respuesta nociceptiva inducida por el formaldehído también inhibieron el edema inducido por este estímulo inflamatorio. Se observó que el BV, pero no el <10 o melitina, inhibió el edema inducido por el formaldehído. Estos resultados indican que la actividad antinociceptiva del BV puede estar relacionada, al menos en parte, con un efecto antiinflamatorio. Además, proporcionan evidencia de que los componentes de masa molecular superior a 10 kDa contribuyen más eficazmente a este efecto. Claramente, el BV contiene diferentes componentes que presentan actividades antinociceptivas y antiinflamatorias. Parece que los componentes con una masa molecular superior a 10 kDa son esenciales para el antiedema, pero no para la actividad antinociceptiva.

Este resultado lleva a la sugerencia de que la melitina, el componente principal del BV, puede contribuir a la actividad antinociceptiva tanto del BV como de <10 . Sin embargo, el BV sin melitina también inhibió la respuesta nociceptiva inducida por el formaldehído. Por lo tanto, aunque la melitina presenta actividad antinociceptiva, no es el único componente que contribuye a la actividad antinociceptiva del BV.

La demostración de que la melitina induce dos efectos contrastantes, la nocicepción (presente estudio, Chen et al., 2006; Li y Chen, 2004; Mackler y Kreil, 1977; Sumikura et al., 2006 ) y la antinocicepción (presente estudio), se suman a resultados que muestran que el BV también presenta dicho perfil. La convincente evidencia de que el BV presenta dicho perfil se obtuvo en el protocolo en el que el BV, administrado en el dorso (inyección sc) de los animales, inhibió la respuesta nociceptiva inducida por el mismo BV inyectado en el dorso de la pata.

Como la inyección sc del BV  en el dorso de los animales probablemente induce una incomodidad, es posible que su actividad antinociceptiva resulte de una activación inespecífica de mecanismos antinociceptivos endógenos asociados con la exposición previa a un estímulo nocivo. La antinocicepción asociada con la exposición a estímulos que inducen malestar y dolor es ampliamente conocida y se han propuesto múltiples mecanismos para explicar dicho fenómeno ( Gebhart, 2004 ). Para explorar esta posibilidad, se evaluo los efectos inducidos por los venenos obtenidos de otras especies, T. serrulatusB. jararaca . Estos venenos indujeron una respuesta nociceptiva, como ya se informó ( Carneiro et al., 2002; Olivo et al., 2007).) Sin embargo, estos venenos no inhibieron la respuesta nociceptiva inducida por el formaldehído. Estos resultados indican claramente que la actividad antinociceptiva de AMV, <10 y melitina no es el resultado de una activación inespecífica de mecanismos antinociceptivos endógenos, sino de la acción de diferentes componentes que inhiben específicamente el procesamiento nociceptivo, tanto en la periferia como en el sistema nervioso central.

Concluyendo, el presente estudio demostró que el BV,  <10 y melitina inducen dos efectos de contraste: la nocicepción y la antinocicepción. A pesar de que la melitina muestra una actividad antinociceptiva, no es el único componente que contribuye a la actividad antinociceptiva del BV. La actividad antinociceptiva del BV no es resultado de una activación no específica de mecanismos antinociceptivos endógenos asociados con la exposición a los estímulos nocivos. Diferentes componentes del BV contribuyen a la inhibición de la respuesta nociceptiva y edema. El conocimiento de las propiedades farmacológicas del BV y sus componentes permitirán el desarrollo de un tratamiento más eficaz de los trastornos inflamatorios y dolorosos.