EFECTOS ANTIFÚNGICOS DE LOS COMPONENTES DEL VENENO DE ABEJA EN TRICHOPHYTON RUBRUM : UN NUEVO ENFOQUE DEL ESTUDIO DEL VENENO DE ABEJA PARA UN POSIBLE AGENTE ANTIFÚNGICO EMERGENTE

Joonsoo Park , Osung Kwon , Hyun-Jin An , y Kwan Kyu Park 

Fondo

El veneno de abeja (BV) ha sido ampliamente investigado para posibles usos médicos. Los usos advertidos recientes de productos basados ​​en BV han demostrado que mitigan los signos de infecciones fúngicas. Sin embargo, el componente que media el efecto antifúngico no ha sido identificado.

Objetivo

Esta investigación compara el veneno de abeja en sus formas total y parcial para evaluar el posible componente responsable del efecto antifúngico.

INTRODUCCIÓN

El veneno de abeja (BV) extraído de Apis mellifera L. se ha utilizado durante siglos como un analgésico adecuado y un agente antiinflamatorio para diversas enfermedades crónicas  . Varios estudios recientes afirman además las propiedades antimutagénicas, antinociceptivas, radioprotectoras, antitumorales y antibióticas de la BV . Se han llevado a cabo amplias investigaciones para evaluar los efectos del BV y los componentes del BV de esa manera han sido elucidados. Sustancias bioactivas que incluyen melitina, apamina, péptidos de desgranulación de mastocitos , serotonina, dopamina, norepinefrina y varias enzimas que enumeran fosfolipasa, hialuronidasa e histidina decarboxilasa  . Varias vías que incluyen la inhibición de los receptores tipo peaje y la translocación del factor nuclear kappa B (NF-κB) y la señalización de la proteína activadora 1 son mecanismos sugeridos para los notables efectos antiinflamatorios del BV . En general, se cree que dos componentes principales del BV, la melitina y la fosfolipasa A2 juegan un papel importante en la inducción de la irritación y la reacción alérgica asociada con las picaduras  de las abejas  . Se sabe que la Melitina, un polipéptido de 26 aminoácidos, tiene efectos antibacterianos . Recientemente, las nanopartículas de perfluorocarbono cargadas con melitina poseían la capacidad de liberar de manera segura cargas útiles de melitina por vía intravenosa y para atacar y destruir las células tumorales  .

Los productos comunes fabricados con BV incluyen aerosoles anti-acné, anti-imperfecciones, humectantes y geles que proporcionan nutrientes. Además, el uso antibacteriano de la niebla basada en BV (BBM) se ha usado inadvertidamente y ha generado atención para aliviar los signos de infecciones fúngicas. Los efectos antimicóticos del BV generalmente han sido menos subrayados en comparación con otras enfermedades inflamatorias. Los artículos sobre el uso de antifúngicos del BV incluyen especies de origen Candidal y Trichophyton especies . Las actividades antifúngicas del BV  contra 10 aislados clínicos de Candida albicans que se cultivaron a partir de sangre y la vagina mostraron actividad antifúngica determinada mediante el uso del ensayo de difusión en disco, el ensayo de microdilución en caldo y el ensayo de la curva de muerte  . Además, la actividad antifúngica del BV contra T. rubrum y T. mentagrophytes mostró un efecto más fuerte que el de fluconazol . Sin embargo, es necesario determinar el mecanismo subyacente y el componente principal de BV que desencadena el efecto antifúngico.

En esta investigación, los componentes del BV incluyendo melitina y apamina, previamente conocidos por generar el efecto antiinflamatorio, junto con el BV  en forma cruda completa y el producto a base de niebla se aplicaron por separado a las colonias de T. rubrum para evaluar la posible componente responsable del efecto antifúngico.

DISCUSIÓN

El BV o su serie de componentes han demostrado una amplia gama de efectos de los agentes antiinflamatorios, antinociceptivos, antibacterianos, a los efectos antitumorales  . Extensos estudios in vitro han confirmado las propiedades versátiles que BV conserva. Con respecto a los amplios estudios realizados con BV, la información con respecto al efecto antifúngico de BV todavía es escasa. Sin embargo, el alcance continuo de la investigación al objeto de conocer el BV en relación con las propiedades antifúngicas ha establecido al BV como un posible agente para su aplicación medicinal.

Además, los usos no aprobados de los productos de BBM se han dirigido a controlar las erupciones del acné. Con base en los informes de robustas actividades antibacterianas de BV contra bacterias tanto Gram negativas como Gram positivas, además del papel de BV en lesiones inflamadas, se han fabricado varios productos para el cuidado del acné basados ​​en BV. Sin embargo, estas líneas de productos de belleza se usan inadvertidamente y estos productos han sugerido el alivio de las lesiones con tinea pedis.

Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue identificar el posible componente subyacente en BV que dificulta el crecimiento y la propagación del patógeno fúngico más común, T. rubrum . En el estudio que comparó los efectos antifúngicos entre los grupos experimentales y los grupos de control en un cierto intervalo de tiempo, solo BV en su forma completa, independientemente de la naturaleza en bruto o en un producto a base de niebla, mostró valores estadísticamente significativos. En la elaboración, el punto de tiempo con respecto al efecto antifúngico exhibido por RBV fue dosis-dependiente ya que 10 mg / 100 μl ( p = 0.026) y 40 mg / 100 μl ( p = 0.000) concentrado mostraron una diferencia de área estadísticamente significativa en comparación con 0.1 mg / 100 μl ( p= 0.084). En base a este hallazgo, se puede inferir un cierto nivel de propiedades fungicidas o fungistáticas producidas por el veneno de abeja cruda. Además, como el efecto antifúngico del veneno de abeja generalmente se secó después del día 5, también se postuló un lapso de tiempo de 5 días para su efectividad de RBV.  El efecto antifúngico no se observó en colonias que fueron tratadas en melitina o apamina. El análisis entre los grupos experimentales y los grupos control no mostró ninguna diferencia estadísticamente significativa con respecto al crecimiento fúngico en ningún nivel de concentración. Se exhibieron resultados similares en las colonias tratadas con apamina. Se sabe que la melitina inhibe el factor de crecimiento derivado de plaquetas y la proliferación de células del músculo liso vascular suprimiendo la activación de NF-κB, Akt y la ruta de la proteína cinasa activada por mitógenos . La reacción hacia abajo inhibe la transcripción de la citocina inflamatoria que ejerce diversos eventos protectores inducidos por la melitina. No se observó ningún parámetro con respecto al crecimiento celular o efecto antifúngico de esa manera.

Curiosamente, el BBM ha demostrado una efectividad similar a la RBV en términos de retraso del crecimiento. Los niveles de concentración efectivos para impedir el crecimiento de la colonia fueron prominentes en los tratados con 10 mg / 100 μl ( p = 0,000) y en 40 mg / 100 μl ( p = 0,030). El factor subyacente puede deberse a una variedad de componentes contenidos en la niebla. Extractos de veneno de abeja, extractos de jalea real, propóleo, pomelo, Beta-glucano, phytoncide, y extractos de portulaca oleracea estaban en el material. Además del veneno de abeja, el propóleo también puede haber desempeñado un papel en el efecto antimicótico. Farghaly  informó que el uso de propóleo en hongos microscópicos , Aspergillus fumigatus (19.2 ± 0.63 mm) mostró los resultados más sensibles al componente. Sin embargo, la sensibilidad disminuyó en otros hongos microscópicos comoGeotricum candidum , C. albicans (16.9 ± 0.58, 16.4 ± 1.2), respectivamente, que aún no se han determinado . Sin embargo, dado que muchos de los productos basados ​​en el veneno de abeja ya están disponibles a través de productos de belleza altamente refinados como el utilizado en este estudio, puede ser útil aplicar directamente dichos productos al área afectada con mayor seguridad y evaluación clínica.

Numerosos estudios han sido investigados para evaluar las propiedades antifúngicas del veneno de abeja. Lee informó que las actividades anticandidas del veneno de abeja y el veneno de abeja dulce se observaron utilizando el método de difusión en disco y el método de microdilución en caldo, lo que confirma que los compuestos tienen un potencial de uso como agentes anticandidas . Los fitoquímicos que exhiben efectos antifúngicos contra T. rubrum y T. mentagrophytes se evaluaron en diferentes estudios. El aceite de cúrcuma de Curcuma longa tenía concentraciones mínimas inhibitorias (MIC) en un rango de 229.8 ~ 919.2 ppm (partes por millón)  . Cuatro amidas fenólicas, dihidro-N-cafeoil tiamina, trans-N-feruloilotopamina, trans N cafeoil tiamina y cis– Se informó que la N -caffeoyltyramine aislada de Lycium chinense tiene actividad antifúngica en un rango de 5 ~ 10 ppm  . Otras moléculas como 6α-O- (β-D-xylopyranosyl- (1 → 3) -β-D-quinovopyranosyl) – (25, S) -5α-spirostan-3β-ol tenían valores de IC50 de 25 μg / ml tenían también se demostró efecto antifúngico contra T. mentagrophytes y T. rubrum . También se demostró que el limoneno ejerce un potente efecto antifúngico contra T. rubrum con un valor MIC de 0.5% .

Con respecto a estos hallazgos, este experimento se esforzó por evaluar el efecto antimicótico de cada componente subyacente a la causa del efecto y el resultado interesante es que solo con el veneno de abeja en su forma completa produjo un nivel significativo de inhibición y concluimos que el veneno en formas separadas no son efectivos

Una teoría es que mientras que la melitina induce especies de oxígeno reactivas para generar el efecto antifúngico, otros componentes como la fosfolipasa A2, la hialuronidasa que aumentan la permeación de la membrana celular y las membranas capilares son necesarias para dar el efecto antifúngico completo  . Además, los estudios indican que los lípidos e hidratos de carbono en el veneno pueden actuar como una opsonina para respuestas inflamatorias adicionales que generen repetidamente el efecto antifúngico  .

Aunque hay una serie de estudios que evalúan el efecto antifúngico del veneno de abeja, la evaluación de componentes específicos dentro de esta mezcla no se ha evaluado antes de este estudio. Además, el uso y el efecto de los productos a base de veneno de abeja también se llevó a cabo para evaluar el efecto antifúngico que se ejerce a partir de estas líneas de productos. La investigación fue concluyente con los seguidores especificados. En primer lugar, se observó el efecto antifúngico en el veneno de abeja, independientemente de la forma cruda o manufacturada. Las pruebas que fueron tratadas solo con la forma completa del veneno de abeja han demostrado el efecto antimicótico a lo largo de nuestro estudio. Las formas separadas de los componentes del veneno de abeja no mostraron ningún valor para impedir el crecimiento de las colonias. En segundo lugar, los efectos fueron dependientes de la dosis ya que se observaron valores estadísticamente significativos dentro de los grupos concentrados de manera diferente en diferentes períodos de tiempo. En tercer lugar, el efecto mostró un período de duración, ya que los tamaños de las colonias se redujeron en su mayoría hasta el quinto día. Fue concluyente que el quinto día fue el punto crítico del tiempo ya que el efecto comenzó a desaparecer después del día 5 y parece necesaria una nueva aplicación del material para generar el efecto antifúngico continuo.   Además, en términos de producto a base de veneno de abeja, se deben considerar investigaciones sucesivas antes de recomendar su uso contra diversas infecciones fúngicas. Sin embargo, el uso ya predominante de estos productos manufacturados junto con preocupaciones de seguridad aprobadas pueden facilitar la comercialización de estos productos manufacturados para atacar infecciones fúngicas.

Aunque este estudio demostró los efectos antifúngicos de los componentes del veneno de abeja junto con el producto de belleza basado en veneno de abeja, se deben realizar más experimentos con muestras de mayor tamaño, más especies fúngicas y más componentes del veneno de abeja para evaluar la interacción molecular y posibles mecanismos subyacentes entre los componentes. Otros estudios de eficacia in vivo están garantizados para la aplicación clínica.