EL VENENO DE ABEJA PARA PROMOVER EL CRECIMIENTO DE CABELLO EN ASOCIACIÓN CON LA INHIBICIÓN DE LA EXPRESIÓN 5Α-REDUCTASA 

Seeun Parque  , Sedef Erdogan  , Dahyun Hwang  , Seonwook Hwang
Departamento de Integrado de Ciencias Biomédicas y de la Vida, Escuela de Graduados, Universidad de Corea , Departamento de Ciencias de la Salud Pública (Cerebro Corea 21 Programa PLUS), Escuela de Graduados, Universidad de Corea ) Departamento de I + D, Koreaeundan Co ) Escuela de Biosystem y Ciencias Biomédicas de la Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de Corea  Departamento de Medicina de Laboratorio, hospital de la Universidad de Corea Guro

Abstracto
La alopecia es un problema importante que puede ocurrir en personas de todas las edades. Estudios recientes muestran que el veneno de abeja puede ser utilizado para tratar ciertas enfermedades como la artritis reumatoide, la neuralgia, y la esclerosis múltiple. En este estudio, se investigó el efecto preventivo de veneno de abeja sobre la alopecia, que se midió mediante la aplicación de veneno de abeja (0,001, 0,005, 0,01%) o minoxidil (2%) como un control positivo para la piel dorsal de ratones hembra C57BL / 6 para el 19 d. Los factores de crecimiento responsables de crecimiento del cabello se analizaron por cuantitativa en tiempo real PCR y análisis de transferencia de Western usando pieles ratones y células de la papila dérmica humanos (hDPCs). El veneno de abeja promueve el crecimiento del cabello y la transición inhibido de la anágena a la fase catágena. En ambos ratones fase anágena y ratones fase catágena inducida por dexametasona, el crecimiento del cabello se incrementó la dosis dependiente en comparación con los controles. El veneno de abeja inhibió la expresión de SRD5A2 , que codifica una 5α-reductasa de tipo II que juega un papel importante en la conversión de testosterona en dihidrotestosterona. Por otra parte, el veneno de abeja estimuló la proliferación de hDPCs y varios factores de crecimiento (factor de crecimiento similar a insulina 1 receptor (IGF-1R), factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF), factor de crecimiento de fibroblastos (FGF) 2 y 7) en abejas hDPCs veneno tratados función de la dosis en comparación con el grupo control. En conclusión, el veneno de abeja es un promotor inhibidor de la 5α-reductasa y el crecimiento del cabello potencialmente potente.
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El cabello es considerado como uno de los rasgos más importantes de la apariencia y la caída del cabello, por tanto, pueden impactar negativamente en la autoestima y dañar la calidad de vida en general. La incidencia de la pérdida de cabello ha aumentado rápidamente en todo el mundo. La pérdida de cabello es inducida principalmente por factores genéticos, sino también el estrés juega un papel importante en estos días, sobre todo en los jóvenes, incluyendo las mujeres. La inflamación en el cuero cabelludo está vinculada a la pérdida de cabello. Un estudio reciente de la comorbilidad entre los pacientes con alopecia se diagnostica muestra que el 74,1% de los pacientes tienen enfermedades inflamatorias como la atopia y problemas de dermatitis de contacto y de salud mental son vistos en el 25,5%. 1 ) Las enfermedades autoinmunes, como la enfermedad de la tiroides, diabetes mellitus y artritis reumatoide son las comorbilidades asociadas con la alopecia areata.
El ciclo de crecimiento del pelo se compone de tres fases a saber anágena, catágena y telógena, que representan la fase de crecimiento, fase de involución, y la fase de reposo, respectivamente. Aproximadamente el 90% del cabello está en fase anágena. 2 ) La alopecia es inducida por varios factores tales como disminución de crecimiento de fibroblastos folículo y renovación celular, aumento de la dihidrotestosterona (DHT), y la quimioterapia. 3 ) Los tres tipos principales de la alopecia androgenética son, alopecia areata, e inducida por quimioterapia. La alopecia androgenética (AGA), el tipo más común de pérdida de cabello, afecta tanto a hombres y mujeres. AGA es causada por dos andrógenos, la testosterona y la dihidrotestosterona. Dos drogas sintéticas (minoxidil tópico y finasterida por vía oral) han sido aprobados por la Administración de Alimentos y Medicamentos para el tratamiento de AGA, pero estos medicamentos tienen bajas tasas de curación (<50%) y los efectos secundarios tales como irritación, dermatitis de contacto alérgica, y aumentar el crecimiento o oscurecimiento de los pelos del cuerpo finas. 4 , 5 )
La dexametasona (DEX) se ha utilizado como un agente de catágena-inductor. En ratones, la depilación induce folículos pilosos en fase anágena (estadios I a VI) dentro de 9 días después de la depilación y el tratamiento DEX desencadena el desarrollo catágena prematura en el día 13 después de la depilación. 6 ) de queratinocitos apoptosis es un factor importante en la regulación de regresión pelo que induce fase catágena. DEX se conoce como un inductor de la apoptosis, lo que significa que DEX induce la apoptosis de los queratinocitos del folículo dado lugar a la terminación prematura de la fase anágena y pronta entrada en fase catágena. 7 )
5α-reductasa convierte la testosterona en DHT, que tiene una afinidad más fuerte para los receptores de andrógenos que la testosterona y induce la expresión de genes relacionados con la minimización de los folículos, estimulando así la pérdida de cabello. 8 ) A pesar de que los inhibidores de la 5α-reductasa tales como el finasteride y dutasteride han sido aprobados para el tratamiento de la pérdida del cabello, que pueden causar efectos adversos graves, como la disfunción sexual, depresión, y la ginecomastia. 9 , 10 )
Idealmente, un tratamiento para la alopecia se debe evitar la pérdida de cabello y promover el crecimiento del cabello. De hecho, una combinación de inhibidores de la 5α-reductasa y promotores del crecimiento del pelo se ha demostrado que mejora la AGA. 11 , 12 ) Alopecia se pueden tratar por vía tópica y / o por vía oral y por el trasplante de pelo. Sin embargo, el trasplante de cabello es muy caro, los medicamentos orales muestran hepatotoxicidad, y medicamentos tópicos no son claramente eficaz para mejorar el crecimiento del cabello. A pesar de minoxidil y finasteride muestran efectos adversos, que todavía se utilizan comúnmente para tratar la AGA. La identificación de alternativas hierbas tratamientos especialmente que exhiben una toxicidad relativamente baja en comparación con las drogas sintéticas, por lo tanto son un área activa de investigación. Varios compuestos naturales se ha informado que tienen propiedades promotoras del crecimiento de pelo. 13 – 16 )
El veneno de abeja es una medicina oriental que ha sido recientemente desarrollado para aliviar el dolor y para el tratamiento de enfermedades como la artritis reumatoide, 17 ) de la enfermedad de Parkinson, 18 ) del cáncer, 19 , 20 )asma, 21 ) y la enfermedad inflamatoria. 22 ) El veneno de abeja contiene muchos péptidos activos tales como la melitina, apamina, péptido degranulación de los mastocitos, y adolapin, así como una variedad de proteínas y aminas incluyendo la fosfolipasa A2, hialuronidasa, histamina, dopamina y norepinefrina. 23 ) En este estudio, se determinó la capacidad de veneno de abeja para prevenir la pérdida de cabello y promover el crecimiento del cabello.

1B . Los folículos pilosos se alargaron en una forma dependiente de la dosis en ratones tratados con veneno de abeja en comparación con el grupo control. Para investigar el efecto inhibidor de veneno de abeja en el desarrollo de la fase catágena, la fase catágena se indujo por tratamiento con dexametasona. La pérdida de cabello se inhibió claramente en ratones fase catágena inducida por dexametasona por tratamiento del veneno de abeja, sobre todo a 0,005 y 0,01%, que era mucho más eficaz que el 2% de minoxidil

El veneno de abeja inhibe la 5α-reductasa y la expresión del factor de crecimiento de queratinocitos en ratones C57BL / 6 ratones
Para investigar si el veneno de abeja inhibe el desarrollo catágena y estimula el crecimiento del cabello en ratones fase catágena inducida por dexametasona C57BL / 6 mediante la inhibición de 5α-reductasa, SRD5A2 (que codifica esteroide 5α-reductasa 2) expresión se midió por análisis de transferencia de tiempo real, PCR y Western.SRD5A2 expresión se redujo significativamente ( p <0,001) de una manera dependiente de la dosis ( Fig. 4A ) en el nivel de ARNm y proteína, tanto en ratones de veneno tratados de abejas y ratones minoxidil tratados, en comparación con el grupo control ( Fig. 4B ) . SRD5A2 los niveles de ARNm se redujo a 8,2, 7,0, 3,6, y 1,1% en ratones tratados con 2% de minoxidil, 0,001, 0,005, y 0,01% veneno de abeja, respectivamente, en comparación con el grupo tratado solamente-dexametasona. SRD5A2 niveles de mRNA fueron 85.1, 44.0, y 12.9% de la del grupo tratado con minoxidil, en ratones tratados con 0,001, 0,005, y 0,01% veneno de abeja, respectivamente. A nivel de proteínas, 5α-reductasa disminuyó 0.93-, 0.64-, 0.61-, y 0,37 veces en los ratones tratados con 2% de minoxidil, 0,001, 0,005, y 0,01% veneno de abeja, respectivamente, en comparación con el grupo de la dexametasona solamente tratada .

KGF estimula la proliferación folicular. KGF expresión se incrementó significativamente ( p <0,05) función de la dosis en ratones tratados con veneno de abeja en comparación con la dexametasona (con un aumento 4.17-, 4.75-, y 5,66 veces en los ratones tratados con 0,001, 0,005, y 0,01% veneno de abeja, respectivamente , en comparación con dexametasona grupo solamente con tratamiento) ( Fig. 5 ). En el grupo tratado con minoxidil, KGF expresión se incrementó 6.4- y 9.9 veces en comparación con el vehículo solamente tratados de control y dexametasona grupo únicamente tratadas, respectivamente.

El efecto de veneno de abejas en la expresión de factores de crecimiento en las células humanas de la papila dérmica
El crecimiento del pelo es estimulada por varios factores de crecimiento incluyendo el factor de crecimiento de fibroblastos 2 (FGF-2), factor de crecimiento de fibroblastos 7 (FGF-7), factor de crecimiento similar a la insulina 1 receptor (IGF-1R), y factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) . FGF2 , FGF7 , IGF-1R y VEGF niveles de expresión de mRNA aumentaron significativamente en los grupos tratados con veneno de abeja-( p <0,05) en comparación con el control . En el grupo tratado con minoxidil 1 M, VEGF mRNA se incrementó 1,9 veces en comparación con el control y 1.30-, 1.80-, y 1,85 veces en el 100, 200, y 500 ng / grupos de veneno de abeja tratados ml, respectivamente, en comparación con el control. Tanto minoxidil y veneno de abeja aumento de la expresión a nivel de proteína de VEGF ( Fig. 7B ) de forma dependiente de la dosis en comparación con el grupo control, con una 1.95-, 2.95-, y el aumento de 2,08 veces en los ratones tratados con 100, 200, y 500 ng / ml veneno de abeja, respectivamente, y un aumento de 1,47 veces en el grupo de minoxidil 2%.

DISCUSIÓN
La alopecia es un problema importante que puede ocurrir en personas de todas las edades. La alopecia se define como la pérdida del cabello anormal y es causada principalmente por factores genéticos y el envejecimiento. La alopecia se considera una enfermedad autoinmune causada por el ataque linfocítica de los bulbos pilosos en fase anágena. 25 ) Los resultados de AGA en disminución de la proliferación de las células del papiloma dérmicos y una reducción en el tamaño del folículo piloso. 26 ) El veneno de abeja promueve la proliferación de hDPCs y alarga los folículos pilosos, lo que impide AGA. El veneno de abeja se compone principalmente de la melitina (aproximadamente 40-50%), así como pequeñas cantidades de polipéptidos y compuestos de bajo peso molecular23 ) ; el veneno de abeja usada en este estudio contenía 56,7% melitina. Melitina tiene una variedad de actividades biológicas 27 , 28 ) incluyendo efectos proliferativos sobre hDPCs y la estimulación del factor de crecimiento. A pesar de que no pudo explicar claramente que la melitina es el principal componente activo, la melitina podría desempeñar algún papel como un componente que promueve el crecimiento del cabello en el veneno de abeja. Se necesitan más estudios para dilucidar el principal compuesto activo del veneno de abeja para promover el crecimiento del cabello.
DHT es una hormona esteroide sexual y andrógenos que se produce a partir de la testosterona por 5α-reductasa en los folículos pilosos, la próstata y los testículos, y en la piel, se produce exclusivamente en las células de la papila dérmica. 29 ) DHT se cree que acortar la fase de crecimiento de los folículos pilosos y es un determinante principal de la pérdida de cabello en los hombres. La pérdida de cabello en individuos del sexo femenino es más complejo, pero DHT sigue desempeñando un papel. Se encontró que el veneno de abeja regula a la baja SRD5A2 de genes y expresión de la proteína 5α-reductasa, lo que sugiere que el veneno de abeja podría tratar la pérdida de cabello DHT-dependiente mediante la inhibición de 5α-reductasa.
IGF-1 es un factor de crecimiento ubicua que se sabe que estimula el alargamiento del cabello y para regular de mantenimiento del folículo del pelo en fase anágena. 30 ) VEGF promueve la angiogénesis facilitando de ese modo la adquisición de nutrientes, que promueve la proliferación del folículo piloso y el crecimiento del cabello. 31 )factores de crecimiento de fibroblastos desempeñan un papel clave en la proliferación HDPC y están involucrados en diversas vías de señalización endocrinos. FGF7 (también conocido como factor de crecimiento de queratinocitos) estimula la proliferación de células epiteliales y afecta a la remodelación de tejidos. Los factores de crecimiento tales como FGF7, FGF2, el VEGF, y el IGF-1 están regulados por incremento en hDPCs para mantener los folículos pilosos en la fase anágena y por lo tanto pueden promover el crecimiento del cabello. Se encontró que el veneno de abeja estimula la expresión de varios factores de crecimiento incluyendo FGF7 , FGF2 , VEGF y IGF-1 , que pueden promover el crecimiento del cabello y evitar la pérdida de cabello a través de efectos sinérgicos.
Longitud del cabello depende de la duración de la fase anágena, 32 ) y, normalmente, 90, 1, y 9% del cabello está en la fase anágena, la fase catágena, o fase telógena, respectivamente. 2 ) En el veneno de abeja grupo tratado con la longitud del cabello se incrementó en comparación con el grupo control, lo que sugiere que el veneno de abeja puede extender la fase anágena. La dexametasona se usa para inducir la fase catágena, que resulta en regresión del folículo del cabello y la pérdida del cabello masiva. Se demuestra que el veneno de abeja promueve claramente el crecimiento del pelo en ratones tratados con dexametasona en comparación con el de sólo dexametasona grupo tratado, lo que significa que el veneno de abeja podría inhibir la fase catágena, que es un atributo importante de agentes terapéuticos exitosos de pérdida de cabello.
Minoxidil evita la pérdida de pelo mediante la supresión de las funciones relacionadas con el receptor de andrógenos-, 33 ) y se han propuesto varios mecanismos para sus efectos estimulantes del crecimiento del cabello, incluyendo la apertura de los canales de potasio y la estimulación de VEGF y la proliferación celular. 34 ) Aunque los mecanismos subyacentes no se comprenden totalmente, el minoxidil es un tratamiento tópico conocido para la alopecia androgénica. El minoxidil se utiliza por lo general como una solución al 2% para las mujeres y la solución al 5% para los hombres. 5 ) En este estudio, hemos utilizado C57BL hembra / 6 ratones y 2% de minoxidil como control positivo. Es importante destacar que se encontró que el veneno de abeja era mejor en la promoción del crecimiento del pelo de minoxidil, especialmente a concentraciones más altas (0,005, 0,01%).
Los objetivos potenciales para el desarrollo de agentes que promueven el crecimiento de pelo alternativa son 5α-reductasa, los receptores de andrógenos, incluyendo los receptores de 5α-reductasa, y factores de crecimiento. 4 )Transplante de Cabello alternativa comúnmente inhiben la 5α-reductasa 35 – 37 ) o inducen factores de crecimiento.38 , 39 ) El extracto de etanol de Asiasari radix de la raíz 40 ) y extracto de metanol de Sophora flavescensarraiguémoslos 41 ) presentan ambas actividades. Los compuestos con múltiples actividades son potencialmente el crecimiento del cabello más prometedor agentes promotores. El veneno de abeja inhibe la expresión 5α-reductasa, inhibe la fase catágena, y aumenta la expresión de factores de crecimiento en el veneno de abeja-hDPCs por lo tanto, podría ser un agente promotor del crecimiento del pelo prometedor.
En la actualidad, los agentes de crecimiento del pelo aprobados tienen efectos adversos; por lo tanto, se requieren tratamientos alternativos con una mayor seguridad y eficacia. A pesar de que el veneno de abeja puede causar una reacción alérgica en los seres humanos, sino que también es conocida por sus diversos efectos como una medicina tradicional para el tratamiento de diversas enfermedades. Además, dentro de las concentraciones utilizadas en este estudio, el veneno de abeja no producen un eritema, edema, la irritación, o la citotoxicidad y la proliferación en vez estimulada de hDPCs. Además, nuestros resultados muestran que el veneno de abeja es más eficaz en la promoción del crecimiento del pelo que el minoxidil. En los ratones de fase inducida por catágena, el veneno de abeja reduce la caída del cabello y estimula el crecimiento de cabello. En resumen, el veneno de abeja puede ser desarrollado como un agente terapéutico para la caída del cabello debido a su capacidad de promover el crecimiento del cabello mediante la estimulación de la expresión de factores de crecimiento celular dérmica y la inhibición del desarrollo de la fase catágena, y su capacidad para prevenir la pérdida del cabello mediante la inhibición de la expresión de 5α-reductasa.
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CONCLUSIÓN
El veneno de abeja promueve el crecimiento del cabello en ratones C57BL / 6 hembras mediante la reducción de la expresión de 5α-reductasa; mediante la estimulación de la expresión de factores de crecimiento tales como VEGF, IGH-1, FGF7, y FGF2; y posiblemente por la inhibición de la fase catágena. El veneno de abeja también aumenta la proliferación de hDPCs. Por lo tanto, hemos demostrado el valor potencial del veneno de abeja como agente promotor del crecimiento del cabello alternativo.